• Real-Time PCR
Martes, 23 Julio, 2019
IQS Tech Transfer


 

La reacción en cadena de la polimerasa, conocida como PCR de sus siglas en inglés Polymerase Chain Reactiones una técnica muy importante en Biología Molecular, que tiene como objetivo obtener in vitro un gran número de copias de un fragmento de ADN concreto. El ADN se va amplificando de forma exponencial en cada etapa de los ciclos de temperatura y, por tanto, esta metodología tiene una gran sensibilidad para detectar i cuantificar secuencias específicas de ácidos nucleicos a partir de muestras biológicas.

El Departamento de Bioingeniería de la IQS School of Engineering ha incorporado recientemente, dentro de su oferta  de servicios, un equipo Real-Time PCR Quantstudio de la marca Thermofisher Scientific. De los muchos tipos de PCR que existen, el denominado ‘Real Time’ incorpora un lector de fluorescencia que permite hacer un seguimiento en tiempo real de la amplificación del fragmento de ADN. El equipo dispone de una placa térmica que regula adecuadamente y rápidamente la temperatura de reacción.  En cada etapa del ciclo de temperatura, se puede medir la fluorescencia con una gran sensibilidad y, por tanto, hacer un seguimiento de la acumulación de ADN. El equipo está dotado de algoritmos de diseño de ensayo, mezclas optimizadas y un sistema flexible de análisis de datos, para facilitar y optimizar el proceso de cuantificación.

Esta técnica se utiliza preferentemente para medir la expresión génica, pero también permite determinar cuantitativamente el ADN inicial contenido en las muestras, según los resultados del proceso de amplificación.

Entre las múltiples aplicaciones de la PCR podemos destacar:

  • Medida de la expresión génica, la más habitual, que permite detectar la influencia de un medicamento en muestras biológicas.
  • Análisis de variaciones genéticas entre individuos, mediante la identificación de genotipos de tipo SNP (Single Nucleotid Polymorphism) o de variaciones en el número de copias de ADN (Copy Number Variation).
  • Detección de ácidos nucleicos en muestras para la realización de diagnósticos.
  • Detección de contaminantes biológicos o patógenos, en el sector agroalimentario.
  • Análisis de la estabilidad de proteínas en respuesta a la temperatura (Protein Thermal Shift).

Este equipo ha sido cofinanciado mediante fondo procedente de la Obra Social “la Caixa”.